Bộ phim sẽ đưa khán giả quay lại với kí ức về một Ô Long Viện với những trò nghịch ngợm quỷ quái của các chú tiểu. Đến với “Tân Ô Long Viện: Tiếu Ngạo Giang Hồ”, 2 trong số 3 nhân vật chính của loạt phim trước sẽ quay trở lại trong phần này, đó là “sư huynh” Ngô Mạnh Đạt – “cặp bài trùng” một thời của Châu Tinh Trì và “sư đệ” mập mạp đáng yêu – Hác Thiệu Văn. Trong phần này, Ô Long Viện mở một đợt nhập môn, nhưng một số đối tượng xấu lợi dụng cơ hội này để tìm cách đột nhập và gây một số bất lợi cho Ô Long Viện. Thế nhưng, chúng lại không biết mình sẽ chạm trán với các môn đệ “siêu nhây” của Ô Long Viện ở những tình huống trớ trêu nhưng không kém phần hài hước.